【求助】DNA残留方法学验证中线性验证的问题

最新回复

• vivian4123 (2015-10-13 16:20:49)

  
  如果标准采用小于100pg/反应的话，应该是验证50-200pg/反应的范围还是按照试剂盒的标准曲线0.03-3000范围进行验证？

• idea2011 (2015-10-13 16:21:00)

  
  我觉得验证50-200就可以了。但是有研发觉得验证0.03-3000更好，范围更广。另外宿主蛋白残留的标准曲线不是直线，不知道线性应该怎么做？

• vivian4123 (2015-10-13 16:21:18)

  QUOTE:

  原帖由 idea2011 于 2015-10-13 16:21 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  我觉得验证50-200就可以了。但是有研发觉得验证0.03-3000更好，范围更广。另外宿主蛋白残留的标准曲线不是直线，不知道线性应该怎么做？

  宿主蛋白的线性，也是按着质量标准的50%-150%范围内进行线性验证吧。线性不是按标准曲线来的，是按着y轴是加标测定值，X轴加标理论值，做直线。

• SO2 (2015-10-13 16:21:33)

  
  在这个验证范围内，你的分析方法，在线性、准确度和灵敏度方面，应该都符合要求。

• #碧海潮生# (2015-10-13 16:21:57)

  
  那是否自建DNA残留检测方法时，没有必要将像试剂盒的标准曲线一样做到0.03pg，只要质量标准的50%-150%处在线性范围内并做好验证就可以了？

• vivian4123 (2015-10-13 16:22:13)

  
  是怎么自建的？自己设计引物和探针？检测什么细胞的DNA残留？

• #碧海潮生# (2015-10-13 16:22:34)

  
  CHO细胞，自己设计引物和探针，样品的DNA用life的试剂盒提取。但是方法的灵敏度要比life的试剂盒低，不知道是否符合要求。

• vivian4123 (2015-10-13 16:22:49)

  
  低一点，能达到你们的检测标准并且能达到专属性要求，应该也是可以的。想请教一下，你们在一个PCR反应中加了几个探针。如果就是一个的话应该不够的

• #碧海潮生# (2015-10-13 16:23:10)

  QUOTE:

  原帖由 vivian4123 于 2015-10-13 16:22 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  低一点，能达到你们的检测标准并且能达到专属性要求，应该也是可以的。想请教一下，你们在一个PCR反应中加了几个探针。如果就是一个的话应该不够的 ...

  为什么加一个探针是不够的，我看到的文献专利都是这么做的

• vivian4123 (2015-10-13 16:23:27)

  
  可否把专利给我看看呀？