【求助】怎样固定住才能使加液体时菌丝不再飘起来

最新回复

• 蓝色雨梦 (2015-11-02 10:47:15)

  真菌需要用乳酸棉兰染色，显微照相才能看的清楚。不知道你的真菌是在固体培养基上培养的，还是震荡培养的？

• yuanyuan (2015-11-02 10:47:39)

  我是要做电镜，振荡培养

• 妮子@ (2015-11-02 10:47:59)

  要看菌丝还是孢子？

• n111 (2015-11-02 10:48:20)

  其实菌丝不像细菌那么小，一般在光学显微镜下，染色就能看清形态，而且操作简单，菌丝也不会变形。
  你用的是电镜扫描处理样本的通常方法，要是必须用电镜的话，你可以试试更换脱水梯度和时间，脱水过程温和一些，变形情况会好转。

• qinqinai (2015-11-02 10:48:42)

  谢谢，是必须要用电镜，因为要观察细胞壁

• huali (2015-11-02 10:49:03)

  可以使用固体培养基培养，盖玻片插片法制片子.

• QQ爱 (2015-11-02 10:49:29)

  呃...我讲过了，是想看液体培养基里的菌丝，谢谢

• yayayu (2015-11-02 10:49:51)

  没事，年纪大了，没注意一定要液体培养，不好意思...

• p1900 (2015-11-02 10:50:11)

  麻烦再问一下，我同时也做了固体平板上的电镜制片。按文献讲的：从菌落上切琼脂块薄片，然后固定脱水等等。我做完干燥之后，发现薄片不再是平的，变卷曲了，想问下还能用吗？扫描电镜的样品是否必须是平的？
  以前没做过，可能问得有点弱，请高手帮忙

• yayayu (2015-11-02 10:50:32)

  对于菌丝会浮起来的问题，很难解决。但是你说变形的话，倒不像你说的那样，戊二醛既然是固定剂，就是为了保持菌体的形态不发生大的变化。我做过细菌的固定，戊二醛和锇酸是固定剂，而后面用乙醇梯度脱水后再用乙酸异戊酯置换，形态会好些。

• 小妖精@ (2015-11-02 10:50:56)

  盖玻片上最好覆一层Formar 膜，或者简单一点镀一层很薄的金箔，这样细胞或细菌容易附着，在后续的处理中不易脱落。把浓度适中的用培养液悬浮吹散的细菌滴在该薄片中央，注意不能散开到盖玻片边缘，使细菌自然沉降0.5～1小时，然后再缓慢从容器边缘加入戊二醛固定液至淹没盖玻片，固定半小时后进行后续处理即可。

• 886爱 (2015-11-02 10:51:17)

  麻烦再问一下，我同时也做了固体平板上的电镜制片。按文献讲的：从菌落上切琼脂块薄片，然后固定脱水等等。我做完干燥之后，发现薄片不再是平的，变卷曲了，想问下还能用吗？扫描电镜的样品是否必须是平的？
  以前没做过，可能问得有点弱，请高手帮忙

• p1900 (2015-11-02 10:51:38)

  扫描电镜主要是观察物体的表面的，只要你的观察对象暴露在表面，就可以观察。只要把有细菌的那一面暴露出来就行。

• yayayu (2015-11-02 10:52:01)

  想在问一下，我扫描电镜制的片，乙醇脱水后没有置换，直接真空干燥了，可以处理下再包埋做透射电镜制片吗？

• 兔子 (2015-11-02 10:52:24)

  我准备试一下盖玻片插片，想问下具体怎么操作？非常感谢

• 小女人@ (2015-11-02 10:52:44)

  是将菌液涂完平板后直接插上盖玻片还是等长出菌落再插上呢？能否具体描述下操作方法呢？