【分享】分享个我自己制作的萤光定量PCR计算器

受别的帖子启发,分享个我自己制作的萤光定量PCR计算器,用软件导出的Excel表格,复制其中的Ct值到本计算器中,直接计算出2-△△T。

使用说明:
1,导出Ct值
2,分别复制各个样本的目的Ct,内参Ct与本计算器中,黑色方框里(分别有2副孔/3副孔的计算页面)
3,最下面2-△△T,直接得出结果,设第一组为1
4,自己再把数据倒入GraphPad Prism 5,做图、分析

Ps:意在分享,有问题欢迎批评提出,共同进步探讨。
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最新回复

  • p1900 (2015-12-17 15:09:13)

    楼主,为什么是目的基因CT值各自减去内参基因CT平均值,而不是目的CT平均值减去
    ??
    内参基因CT,最后得到一个△△T呢
  • xiaoxiaojinglin (2015-12-17 15:09:33)

    我的理解是:
    因为目的基因的差异比较重要,包含了更多的统计信息。
    而内参基因表达量其实比较恒定的,变化差异较小。
    这也是有些时候内参只跑2孔甚至1孔的原因。
  • xiaoxiaojinglin (2015-12-17 15:09:53)

    有一个小疑问,每次试验的副孔是用来减少操作带来的差异吧?目的基因的差异应该是不同批次的PCR结果吧?这样计算单次试验结果的时候不应该是目的基因平均值-内参平均值吗?
  • 美人鱼 (2015-12-17 15:10:14)

    你的意思应该是重复试验,然后在最后统计是吧?
    这个应该跟试验设计有关,应该也是可以的
    我们这边说是尽量让样本在同一个批次里做,这样他们相当于在同一个条件下进行的