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【求助】RT-QPCR大家都用什么做标准曲线？
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进行反转录定量PCR，大家都用什么来作为标准品作标准曲线啊？用CDNA还是其普通PCR的扩增产物，还是质粒？如果用两步法的定量PCR，怎么样保证标准品的扩增效率与样品的扩增效率一致？
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字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2016-1-08 10:29 作者: rxcc33 来源: 分析测试百科网
最新回复
rxcc33 (2016-1-08 10:30:18)
怎么没有人回复啊？
用CDNA，没有办法知道特定基因的标准品拷贝数，用普通PCR产物或者质粒作为标准品，其扩增效率可能与样品的扩增效率不一致。不知道大家平时研究是用的什么做的标准品。
xiaoxiaoniao (2016-1-08 10:30:33)
一般都是用质粒的，pcr产物不纯，做标准不好。cdna做标准？量没法准确。
koook5695 (2016-1-08 10:30:56)
用样品做梯度稀释做标准曲线，不需要绝对定量，做相对定量，主要是看扩增效率是否一致，这样做就可以了
kuaizige (2016-1-08 10:31:11)
jude (2016-1-08 10:31:27)
我也需要了解类似的问题。国外文献有用18s rRNA作为标准品的。
yayya (2016-1-08 10:31:44)
【求助】RT-QPCR大家都用什么做标准曲线？