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【求助】各位高手帮我看看冬虫夏草中腺苷的图谱
最近在做冬虫夏草的含量测定，因为是新手，好多东西都不清楚，恳请各位高手帮忙解决几个问题。药典的条件是这样的：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸盐缓冲液（PH6.5)甲醇（85：15）为流动相，波长260nm。我做出来的峰是这样的：样品图，再还有是对照品图【求助】各位高手帮我看看冬虫夏草中腺苷的图谱
想问一下，腺苷峰本来就是这样的吗？还有，含量的计算公式是怎样的呢？
对照：加90%甲醇制成每1ml含20ug的溶液。
样品：称0.5g,加90%甲醇10ml,称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用90%甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液即得。
进样量为10ul.
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最新回复
xuuuu (2016-2-27 16:45:17)
含量的计算公式：
W(%)=A样*C对*10*100%/A对
小困 (2016-2-27 16:45:34)
小困 (2016-2-27 16:46:01)
QUOTE:
请问这个10代表的是什么？我的实验步骤是这样的：对照0.0025g到100ml容量瓶中，用90%甲醇稀释至刻度；供试品0.5g加90%甲醇10ml加热回流.我的理解公式应该是S样/C样=S对/C样，所以C样/10=S样*C对/S对=S样*（M/100)/S对=S样*M*0.1/S对，M为对照品的称量。
不知道这样计算对不对？刚接触这块，什么都不懂，请大虾们不要见笑！
小困 (2016-2-27 16:46:31)
换了流动相的比例，还是不理想！各位高手帮帮忙啊，给点意见！
橘子水儿 (2016-2-27 16:46:49)
小困 (2016-2-27 16:47:04)
耗子=== (2016-2-27 16:47:22)
一般来说，药典的方法都还可以，只要微调一下就可以了
5楼中的那个10，是单位之间的换算，按公式计算出来时mg/g，但是结果是按%计算，所以要单位换算统一
911 (2016-2-27 16:47:37)
是不是你的系统有漏？或者色谱柱坏了？
百分比 (2016-2-27 16:47:59)
小困 (2016-2-27 16:48:20)
QUOTE:
进了，峰也是毛毛糙糙的，不知道是怎么回事小困 (2016-2-27 16:48:38)
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我做完以后，先用10%甲醇冲，再用纯甲醇冲，应该没问题的吧
join (2016-2-27 16:48:52)
1. 问题可能在你这个样品的配制上，换个厂家的甲醇试试
2. 样品溶剂过强，用流动相可以溶解样品吗？也有资料是50%甲醇溶解。
小困 (2016-2-27 16:49:19)
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这个标准是药典规定的，我看到网上其他人写的论文也是用跟我同样的方法，但做出来的峰比我的好看多了。跟药典规定不一样可以吗？
dotaaa (2016-2-27 16:49:44)
腺苷在无水乙醇中溶解性较差，不能被完全溶解，一般用75％ ～50％的乙醇溶液配置腺苷较好。
dotaaa (2016-2-27 16:50:03)
小困 (2016-2-27 16:50:23)
QUOTE:
我的对照也是用90%甲醇配的，您的意思是用50%甲醇试试？rxcc33 (2016-2-27 16:50:40)
太丑了，你的图。
有标准就先按标准做，发现问题再分析改进，改进是为了配合你的检测条件。
小困 (2016-2-27 16:51:08)
QUOTE:
我也知道我的图丑了！我就是按照标准做了然后还出这么丑的图才上来请教大家的呀65urh (2016-2-27 16:51:35)
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药典有规定的，不能改的
我们也在做发酵虫草中的腺苷，不过是用盐溶液提取的
小困 (2016-2-27 16:51:54)
QUOTE:
请问你说的用盐溶液提取是把90%甲醇换成缓冲液的意思吗？对照和样品都用流动相溶解吗？【求助】各位高手帮我看看冬虫夏草中腺苷的图谱