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【求助】SDS-PAGE的样品处理中,如果不加热,...
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发表于: 2014-6-17 16:54 作者: zhy平平 来源: 分析测试百科网
查看完整版本请点击这里:
【求助】SDS-PAGE的样品处理中,如果不加热,...
想电泳后蛋白仍有活性所以样品不加热,也不加巯基乙醇
电泳后到底是亚基还是整个蛋白的分子量?
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【求助】SDS-PAGE的样品处理中,如果不加热,...
我也来说两句
查看全部回复
最新回复
duoduo
(2014-6-17 16:54:45)
能跑出条带,我是在加入loading buffer (不含巯基乙醇
)后,室温下放置30min,再上样电泳的。
电泳后是整个蛋白的分子量。
lxh031
(2014-6-17 16:55:06)
没有问题。即使刚和loading buffer (不含巯基乙醇)混合,马上上样也没有问题。
summerxx
(2014-6-17 16:55:26)
SDS电泳后,蛋白质失活了吧,没有活性了,只有重新使其重新复活才行,我说得对吗?
moonlight45
(2014-6-17 16:56:31)
想电泳后蛋白仍有活性所以样品不加热,也不加巯基乙醇
电泳后到底是亚基还是整个蛋白的分子量?
=====================================
要想有活性,要跑native gel, 不能加SDS。
831226
(2014-6-17 17:02:36)
请问, 哪里有native gel的相关知识啊,谢谢!
plaa
(2014-6-17 17:03:07)
加SDS可以的,也可以后活性的,复性一下,用2.5%的Triton100室温半小时即可.
qhyu
(2014-6-17 17:03:30)
可以跑出带,但是条带不太好看啊,看你是什么用途了。
jujuba
(2014-6-17 17:05:19)
如果你是想要活性,最好是用native-PAGE方法,这样跑出来的蛋白基本上能保持活性,加SDS变性后再复性效率很低,活性很难恢复过来.但native-PAGE的条件很难控制,控制的好跑出来的效果可以和SDS相媲美!
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我也来说两句
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【求助】SDS-PAGE的样品处理中,如果不加热,...
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duoduo (2014-6-17 16:54:45)
能跑出条带,我是在加入loading buffer (不含巯基乙醇
)后,室温下放置30min,再上样电泳的。
电泳后是整个蛋白的分子量。
lxh031 (2014-6-17 16:55:06)
没有问题。即使刚和loading buffer (不含巯基乙醇)混合,马上上样也没有问题。
summerxx (2014-6-17 16:55:26)
moonlight45 (2014-6-17 16:56:31)
电泳后到底是亚基还是整个蛋白的分子量?
=====================================
要想有活性,要跑native gel, 不能加SDS。
831226 (2014-6-17 17:02:36)
请问, 哪里有native gel的相关知识啊,谢谢!
plaa (2014-6-17 17:03:07)
加SDS可以的,也可以后活性的,复性一下,用2.5%的Triton100室温半小时即可.
qhyu (2014-6-17 17:03:30)
可以跑出带,但是条带不太好看啊,看你是什么用途了。
jujuba (2014-6-17 17:05:19)
【求助】SDS-PAGE的样品处理中,如果不加热,...